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供应 flag标签抗体磁珠

★ BioMag -Anti Flag抗体包被磁珠

一、概述:

抗Flag (DYKDDDK)免疫磁珠标签抗体免疫磁珠由高性能的特异性 IgG1 单克隆抗体与磁珠共价偶联,后期经过封闭处理,可以直接用于捕获Flag标签蛋白,具有较高的Flag标签融合蛋白结合量以及非特异结合低的特点,可用于Flag标签蛋白免疫沉淀以及蛋白的分离纯化。

二、产品规格:配体抗Flag标签抗体磁珠表层材料超顺磁亲水高分子磁珠包装5ml  100ml粒径大小300nm/1μm浓度2mg/ml结合量>20μg/mg磁珠(对Flag标签蛋白的结合量)浓度2mg/ml建议pH使用范围1-10沉降系数2mg/ml磁珠在60ul以下体积沉降时间应该不大于10s批间差<5%磁珠保存液含有保护剂的缓冲液,保质期两年。保存4℃,禁止冷冻,使用前请充分混匀三、使用方法:


1.磁珠的准备

1.1 用移液枪轻柔吹打重悬Anti-Flag标签免疫磁珠,转移50-100 μL免疫磁珠到新的离心管中(实际取用量可根据样品中目的蛋白的含量适当增减)。

1.2 加入 1ml TBST缓冲液,用移液枪轻柔吹打重悬免疫磁珠,磁力架上静置实现磁液分离后, 移除上清,重复上述步骤2次。

2.样品的结合

2.1 加入500 μL细胞裂解液,室温旋转混匀孵育2小时或者4°C条件下过夜。

2.2 磁力架上静置实现磁液分离后,将上清液转移到新的离心管中备用(上清液可能还有过量的Flag标签目的蛋白)。

3.磁珠洗涤

3.1 加入1mL TBST缓冲液洗涤磁珠,磁力架上静置实现磁液分离后, 移除上清。

3.2 重复洗涤大约3次,直到洗涤后的上清液中OD280小于0.05为止。

注意:如上清液的OD280大于0.05,适当增加洗涤次数

4.目的蛋白洗脱

4.1 根据下游用途选择洗脱方法。对于直接检测目的蛋白的情况,在上述所得沉淀中加入50 μL 1×蛋白上样缓冲液,煮沸5 min,在磁力架上静置实现磁液分离后,吸取上转移到新的离心管中。

4.1 取上清进行SDS-PAGE检测。